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Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑核心產(chǎn)品線與技術(shù)原理

更新時間:2025-09-08點擊次數(shù):61
在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因治療和生物制藥等前沿科研領(lǐng)域,基因轉(zhuǎn)染技術(shù)是實現(xiàn)外源DNA、RNA或蛋白質(zhì)導(dǎo)入真核細(xì)胞的核心手段。通過轉(zhuǎn)染,研究人員可以研究基因功能、調(diào)控蛋白表達(dá)、構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系或開發(fā)基因療法。在眾多轉(zhuǎn)染試劑品牌中,Invitrogen™憑借其性能、廣泛的細(xì)胞適用性和高度的可重復(fù)性,成為全球?qū)嶒炇倚刨嚨钠放啤?

一、什么是轉(zhuǎn)染?Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑為何重要?

轉(zhuǎn)染是指將外源核酸(如質(zhì)粒DNA、siRNA、mRNA、CRISPR/Cas9組件)導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞的過程。由于細(xì)胞膜具有天然屏障作用,裸露的核酸難以進(jìn)入細(xì)胞,因此需要借助轉(zhuǎn)染試劑作為“分子載體”,幫助核酸穿越細(xì)胞膜并釋放到細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中。

Invitrogen自20世紀(jì)90年代推出脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑以來,持續(xù)創(chuàng)新,開發(fā)出適用于不同細(xì)胞類型、實驗?zāi)康暮蛻?yīng)用場景的全系列轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。其試劑以高轉(zhuǎn)染效率、低細(xì)胞毒性、操作簡便著稱,廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物篩選、疫苗開發(fā)和基因編輯等領(lǐng)域。

二、Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑核心產(chǎn)品線與技術(shù)原理

Invitrogen的轉(zhuǎn)染試劑主要基于以下幾種技術(shù)平臺:

1.Lipofectamine™系列:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的黃金標(biāo)準(zhǔn)

-Lipofectamine™3000:適用于大多數(shù)貼壁和懸浮細(xì)胞,尤其對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(如原代細(xì)胞、干細(xì)胞)表現(xiàn)出色。它利用陽離子脂質(zhì)與核酸形成脂質(zhì)體復(fù)合物(lipoplexes),通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,并在內(nèi)體中釋放核酸。配套的P3000™增強劑可進(jìn)一步提升效率。

-Lipofectamine™2000:經(jīng)典款,廣泛用于HEK293、HeLa等常用細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染效率高,成本適中。

-Lipofectamine™RNAiMAX:專為小RNA(siRNA、miRNA)設(shè)計,實現(xiàn)高效的基因沉默(RNA干擾),廣泛用于功能基因組學(xué)研究。

-Lipofectamine™MessengerMAX:專為mRNA轉(zhuǎn)染優(yōu)化,適用于瞬時蛋白表達(dá)、疫苗研發(fā)和基因編輯(如Cas9 mRNA遞送)。

2.Polyethylenimine(PEI)基試劑:高性價比的聚合物選擇

-PEI MAX™:一種線性陽離子聚合物,通過與DNA形成緊密復(fù)合物實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染。特別適用于大規(guī)模質(zhì)粒生產(chǎn)和懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染(如CHO、HEK293細(xì)胞),在生物制藥工業(yè)中用于瞬時表達(dá)重組蛋白。

-JetPEI®(Invitrogen授權(quán)品牌):性能穩(wěn)定,適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

3.其他專用試劑

-Fugene®HD(原Roche,現(xiàn)由Invitrogen分銷):低毒性,適用于敏感細(xì)胞。

-ScreenFect®系列:針對高通量篩選優(yōu)化。

三、技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用特點

1.高轉(zhuǎn)染效率

在優(yōu)化條件下,可達(dá)80%以上的轉(zhuǎn)染率,確保實驗結(jié)果的顯著性和可重復(fù)性。

2.廣泛的細(xì)胞兼容性

覆蓋HEK293、HeLa、CHO、HepG2、神經(jīng)元、原代細(xì)胞、干細(xì)胞等多種細(xì)胞類型。

3.低細(xì)胞毒性

經(jīng)過優(yōu)化的配方減少對細(xì)胞代謝的干擾,維持細(xì)胞活力,適合長期實驗。

4.操作簡便

多數(shù)試劑采用“混合-加入”一步法,無需更換培養(yǎng)基,適合高通量操作。

5.多功能性

支持DNA、siRNA、miRNA、mRNA、CRISPR核糖核蛋白(RNP)等多種核酸類型的遞送。

四、典型應(yīng)用場景

1.基因功能研究

過表達(dá)或敲低特定基因,研究其在信號通路、細(xì)胞周期、凋亡中的作用。

2.蛋白質(zhì)表達(dá)與純化

瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá)重組蛋白,用于結(jié)構(gòu)生物學(xué)或抗體生產(chǎn)。

3.RNA干擾(RNAi)

使用siRNA或shRNA實現(xiàn)靶基因沉默,篩選功能基因。

4.基因編輯

遞送CRISPR-Cas9質(zhì)?;騌NP復(fù)合物,實現(xiàn)基因敲除、敲入或堿基編輯。

5.啟動子與調(diào)控元件分析

轉(zhuǎn)染報告基因載體(如luciferase),研究啟動子活性。

6.疫苗與基因治療研發(fā)

mRNA疫苗開發(fā)中,高效遞送編碼抗原的mRNA至細(xì)胞。

五、使用建議與優(yōu)化策略

-細(xì)胞狀態(tài):使用對數(shù)生長期、高活力(>90%)的細(xì)胞;

-核酸質(zhì)量:使用高純度、無內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA;

-試劑與核酸比例:遵循說明書推薦比例,可進(jìn)行梯度優(yōu)化;

-血清影響:部分試劑(如Lipofectamine™2000)可在含血清培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)染,提高細(xì)胞存活率;

-轉(zhuǎn)染后處理:根據(jù)實驗需求,在適當(dāng)時間收集細(xì)胞或進(jìn)行功能檢測。

六、結(jié)語

Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑不僅是實驗室的常規(guī)耗材,更是推動生命科學(xué)研究進(jìn)步的關(guān)鍵工具。其不斷創(chuàng)新的產(chǎn)品線,為科學(xué)家提供了高效、可靠、靈活的基因遞送解決方案。無論是在基礎(chǔ)科研的探索中,還是在生物醫(yī)藥的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程中,Invitrogen都以其性能和全球技術(shù)支持體系,贏得了廣泛贊譽。掌握其使用技巧,優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,將幫助研究人員更高效地實現(xiàn)基因操控,解鎖生命科學(xué)的無限可能。 
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